源自小鼠皮肤组织的细胞类型特异性外泌体的标记、分离和表征

细胞外囊泡是一组参与细胞间通讯的异质膜结合囊泡，在质膜（外泌体）或通过内吞作用（外泌体）形成。迄今为止，大多数外泌体研究都集中在体外系统或源自体液的外泌体上，而组织源性的外泌体仍未得到充分探索。在这里，我们提出了一种使用细胞类型特异性启动子驱动的报告基因构建体的方案，用于靶向标记和随后从小鼠组织体内特定细胞类型中分离外泌体。由于目前主要基于大小、密度或表面标记的分离技术的局限性，外泌体和外泌体之间的区分仍然具有挑战性。为了解决这个问题，我们的方法利用基因工程来特异性标记外泌体，从而能够从复杂的异质细胞外囊泡生物库中精确识别和分离它们。通过电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析、抗体外泌体阵列测定和其他成熟技术对分离的细胞类型特异性外泌体进行表征。外泌体的标记和分离持续 2-3 天，旨在让具有基本实验室能力的研究人员能够访问。该协议通过能够从单个细胞类型或多种细胞类型组合中分离出细胞类型特异性外泌体，促进外泌体介导的细胞通讯的研究。该方案中的大多数实验都使用了小鼠伤口边缘皮肤组织，但原则上，该方案也可以应用于其他组织以分离外泌体，并根据需要进行一些修改。这种方法为探索细胞类型特异性外泌体在细胞间通讯中的功能作用开辟了新途径。

原标题：Labeling, isolation and characterization of cell-type-specific exosomes derived from mouse skin tissue

通讯作者：Chandan K. Sen & Subhadip Ghatak

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