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流式电转染系统:原理、应用与前沿探索
在现代生命科学与生物技术领域,流式电转染系统犹如一颗璀璨的明珠,散发着耀眼的光芒。它所涉及的技术原理和应用场景,对于许多科研工作者以及相关领域的从业者来说,都有着至关重要的意义。流式电转染系统的核心在于其巧妙地利用了电场的作用来实现细胞的转染。当细胞悬浮在特定的缓冲液中时,施加适当的电场脉冲,会在细胞膜上形成微小的孔隙。这些孔隙就像是临时开启的“通道”,使得外源物质,比如核酸分子等,能够进入细胞内部。这一过程看似简单,实则蕴含着精密的科学设计。电场的强度、脉冲的时间和次数等参...
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质粒中 IL-12 和 CD40 配体的瘤内表达产生消除肿瘤 T reg 的抗肿瘤反应
瘤内免疫疗法(ITIT)致力于通过直接刺激肿瘤中的免疫系统来逆转局部肿瘤介导的免疫抑制,从而产生有效的抗肿瘤免疫。使用体内质粒转染作为瘤内癌症免疫疗法的白细胞介素12(IL-12)的体内表达进入转移性黑色素瘤的II期临床试验,但临床成功率有限。我们试图通过在编码IL-12的质粒治疗中加入表达CD154(CD40配体)的质粒来提高体内IL-12电穿孔的疗效,并评估对实体瘤的疗效。患有皮内B16F10黑色素瘤或MC38小鼠结肠癌肿瘤的小鼠每周接受2次瘤内(IT)注射编码IL-12...
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基于质粒的电穿孔在永生化 T 淋巴细胞中进行高效基因工程
突出第一次全面表征永生化T细胞系CTLL-2和HT-2。质粒电穿孔可实现高效且具有成本效益的T细胞工程。用于T细胞电穿孔的优化转基因启动子和质粒结构。多功能转基因递送策略简化了T细胞工程工作流程。用于精确T细胞工程的高效CRISPR/Cas9基因组编辑工具包。摘要转基因T细胞疗法最近的临床成功凸显了加速T淋巴细胞基础研究和功能筛选方法的迫切需要。然而,一种简单且具有成本效益的T细胞高效基因工程方法仍然难以捉摸。目前的方法通常依赖于病毒转导,这是劳动密集型的,需要严格的生物安全...
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植物中基于纳米材料的基因递送:即将到来的基因革命?
突出转基因允许将有益性状(如抗虫害和改善营养)引入作物,从而有助于满足全球粮食需求并提高农业复原力。农杆菌介导的转化和生物列表学等传统方法面临效率低、组织损伤和不可预测的基因整合等问题,这些问题限制了其有效性。纳米颗粒通过克服植物细胞壁障碍来提高基因递送效率和精度。将纳米技术与CRISPR/Cas和组织培养方法相结合,可以显著推进植物基因工程。纳米基因递送可以靶向细胞核、叶绿体和线粒体基因组,而不会造成明显的组织损伤,从而提高基因修饰的精度和有效性。摘要植物基因工程中的常规基...
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使用噬菌体展示鉴定免疫原性共生抗原
体液免疫在建立和维持宿主-微生物群共生以及对病原微生物的免疫力中起着重要作用。然而,鉴定在屏障和全身组织内引发适应性免疫反应的抗原是进一步理解这种宿主-微生物对话的重大障碍。在这里,我们提供了一种方案,通过使用噬菌体(噬菌体)展示介导的抗体/抗原生物淘选来鉴定共生微生物和病原微生物表达的免疫原性蛋白抗原。该程序需要生成M13噬菌粒文库,生产ORFeome(开放阅读框总量)噬菌体文库,然后进行多轮基于亲和力的免疫沉淀,随后通过ELISA、ELISPOT和/或B细胞四聚体生成进行...
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PCR仪:精准扩增背后的科学密码
在现代分子生物学的实验室中,有一种看似平凡却又至关重要的设备,它犹如一位默默耕耘的幕后英雄,在生命科学研究领域发挥着关键作用,这就是PCR仪。PCR仪,全称为聚合酶链式反应仪,它的工作原理基于一种能够在短时间内大量扩增特定DNA片段的技术——聚合酶链式反应。这一过程就像是一场精准的分子复制接力赛。首先,在高温条件下,DNA双链打开,如同解开一条复杂的绳索,使其分成两条单链模板。接着,在适宜的温度下,引物与模板DNA的特定序列相结合,这一步犹如为复制过程找到了精准的起始点。然后...
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揭秘!高精度蛋白晶体培养箱的秘密
在生命科学的广阔领域中,蛋白质作为生命活动的基石,其结构与功能的解析一直是科学家们追求的目标之一。而要实现这一目标,高精度蛋白晶体培养箱则扮演着至关重要的角色。这不仅仅是一台设备,更是连接微观世界与宏观认知的桥梁,为科学家们揭示生命的奥秘提供了可能。一、蛋白晶体培养的重要性蛋白质是执行生命活动的关键分子,从酶促反应到信号传导,从肌肉收缩到免疫系统的防御,无不离不开蛋白质的参与。为了深入理解这些复杂的生命过程,科学家需要首先了解蛋白质的结构。然而,直接观察原子级别的蛋白质结构是...
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低温电转仪:实验成功背后的神秘钥匙?
在现代科学研究与生物技术领域,低温电转仪扮演着较为关键的角色。它并非是那种一亮相便能吸引大众目光的仪器设备,却悄然在细胞研究、基因工程等诸多科研前沿阵地发挥着不可替代的作用。低温电转仪的工作原理,简单来说,是利用电场的作用,促使细胞膜的通透性发生改变,从而让外源物质,比如核酸等大分子,能够进入细胞内部。而低温环境在其中有着的意义,它有助于维持细胞内一些结构与成分的稳定性,减少因电转过程中可能产生的热效应等对细胞造成的损伤,就如同给整个电转过程营造了一个相对“温和”的操作空间,...
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基因导入仪:开启生命密码新探索
在探索生命奥秘的征途中,科学家们不断发明创造各种工具,以期深入生命的微观世界。基因导入仪,便是这众多工具中一颗璀璨的明珠。基因导入仪,从其诞生的那一刻起,就肩负着重大的使命。它犹如一把精准的钥匙,试图开启生物体遗传信息宝库的大门。科学家们面临着如何将外源基因有效地导入到目标细胞中的巨大挑战。传统的基因导入方法往往存在效率低下、对细胞损伤大等问题。而设备的出现,为解决这些问题带来了新的希望。这种仪器的工作原理涉及多个复杂而又精妙的环节。它通过特定的技术手段,将携带有目的基因的载...
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探秘流式电转仪的神秘面纱
在现代生物学的广阔天地里,有这样一款仪器,它如同一位不知疲倦的“搬运工”,在微观世界里默默耕耘,将生物大分子精准地送达目的地,为科研探索铺就了一条条通往未知的道路,它就是流式电转仪。当我们把目光聚焦到细胞这个微小却复杂得惊人的世界时,会发现细胞膜就像是一座坚固的堡垒,守护着内部的奥秘。而许多时候,科学家们急需将这些细胞内的生物大分子,比如蛋白质、核酸等转移出来,或者把外界特定的物质送入细胞内,去探究生命活动的本质规律,这时候它就闪亮登场了。它的工作原理,简单来说,是建立在电场...
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多功能电转仪的奥秘与实践
在现代生物学、医学及基因工程的研究领域,多功能电转仪作为一种集成技术与多功能性的实验设备,正发挥着越来越重要的作用。它不仅能够高效地将外源大分子物质如DNA、RNA等导入细胞内部,实现基因的转移和表达,还为科研人员提供了一个强大的工具,助力他们在细胞治疗、基因编辑、药物递送等前沿研究中取得突破。本文将深入探讨多功能电转仪的工作原理、核心组件、应用领域以及其在科学研究中的实践价值。一、工作原理多功能电转仪工作原理基于电穿孔技术。在瞬间强大电场的作用下,细胞的细胞膜会发生可逆性的...
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高通量蛋白纯化系统概述及其运作机制
在现代生命科学研究和生物制药领域,高通量蛋白纯化系统作为一种分离技术,正发挥着越来越重要的作用。这一系统不仅提升了蛋白质纯化的效率,还为蛋白质的结构与功能研究、药物研发及生产提供了强有力的支持。本文将深入探讨基本概念、工作原理、关键步骤以及应用领域,以期为读者提供一个全面而深入的理解。高通量蛋白纯化系统,顾名思义,是一种能够同时处理多个样品,实现大规模、高效率蛋白质纯化的设备。它集成了多种传统纯化方法,如亲和层析、离子交换层析、逆流层析等,通过高度自动化的仪器系统,实现了样品...
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