电转仪的核心工作原理是利用高压脉冲电场在细胞膜上形成瞬时微孔，使外源物质（如DNA、RNA、蛋白质）快速进入细胞，实现高效的细胞转化或转染，以下是通俗且清晰的原理拆解：1.核心前提：细胞膜的通透性变化正常情况下，细胞膜具有选择透过性，外源大分子（如质粒DNA）无法自由进入细胞。高压电场的作用是暂时改变细胞膜结构，为外源物质提供进入通道。2.关键步骤：从电场施加到物质进入样品准备：将待转化的细胞与外源物质（如DNA溶液）均匀混合，加入专用电转杯（电极间距固定，保证电场均匀）。电...

多功能电转仪作为细胞实验、分子生物学研究中的关键设备，其稳定性直接影响实验成功率与数据可靠性。本文针对用户反馈的典型故障现象，结合技术原理提供系统性排查方案，帮助科研人员快速定位问题并恢复仪器性能。一、电源异常类故障解析当多功能电转仪出现无法开机或自动关机现象时，首先检查供电系统稳定性。使用万用表测量输入电压是否在允许波动范围内，特别要注意实验室稳压电源的实际输出能力。此时应重点观察电源指示灯闪烁频率，若呈现不规则闪动则可能是内部滤波电容老化失效的表现。保险丝熔断是另一常见诱...

CURVATURE类囊体1（CURT1）家族的植物蛋白及其原核CurT同源物是叶绿体和蓝藻中类囊体膜系统三维结构的关键决定因素。由于CURT1/CurT家族的进化起源似乎与类囊体本身的进化一致，因此塑造类囊体系统已被广泛认为是它们的主要作用。在这项研究中，我们提供了强有力的证据，表明CurT除了调节类囊体结构之外，还参与了聚囊藻属PCC6803和SynechococcuselongatusPCC7942的细胞分裂和类囊体裂变/分配，可能是通过与关键细胞分裂蛋白FtsZ的物理相...

低温电转仪的工作原理核心是利用低温环境保护细胞活性，同时通过高压脉冲电场在细胞膜上形成可逆孔道，使外源核酸（如DNA、RNA）进入细胞，实现高效转化。1.核心机制：电穿孔效应这是电转仪的基础工作原理，分为三个关键步骤：电场施加：仪器向含有细胞和外源核酸的电转杯施加短时、高压的脉冲电场。电场强度通常在1-30kV/cm，脉冲时间从微秒到毫秒级不等，具体参数需根据细胞类型调整。细胞膜穿孔：高压电场会破坏细胞膜的磷脂双分子层结构，使其产生瞬时、可逆的微孔（即“电穿孔”）。这些微孔的...

在精密仪器、医疗设备及半导体制造等领域，TEC温控板因其精准的温度控制能力被广泛应用。然而，长期高负荷运行下难免出现各类故障，影响系统稳定性和设备寿命。本文将针对过载保护触发、传感器失效等典型问题提供系统性排查方法与解决方案，助力工程师快速恢复设备正常运行。一、过载保护机制解析与应对策略当电流超过额定值时，TEC温控板内置的保护电路会主动切断电源以防止器件损坏。此时LED显示屏通常显示“OL”或“PROT”报警代码。首先应检查负载端是否存在短路现象——使用万用表逐段测量导线电...

细胞外囊泡是一组参与细胞间通讯的异质膜结合囊泡，在质膜（外泌体）或通过内吞作用（外泌体）形成。迄今为止，大多数外泌体研究都集中在体外系统或源自体液的外泌体上，而组织源性的外泌体仍未得到充分探索。在这里，我们提出了一种使用细胞类型特异性启动子驱动的报告基因构建体的方案，用于靶向标记和随后从小鼠组织体内特定细胞类型中分离外泌体。由于目前主要基于大小、密度或表面标记的分离技术的局限性，外泌体和外泌体之间的区分仍然具有挑战性。为了解决这个问题，我们的方法利用基因工程来特异性标记外泌体...

当实验室里的体外电转仪突然亮起警示灯或无法正常工作时，许多科研人员的第一反应可能是联系厂商维修。但其实大部分常见故障都可以通过基础排查和简单操作自行解决。掌握这些技能不仅能节省时间成本，更能避免因设备停机影响实验进度。以下是针对该设备典型问题的系统性解决方案。电源问题是引发故障的常见原因之一。若体外电转仪无响应，首先要检查插座是否通电，可尝试更换其他电器验证电源接口有效性。部分型号配备独立保险丝装置，位于机身背面或底部隐蔽位置，用十字螺丝刀小心打开保护盖后即可查看。发现熔断时...

在现代生命科学与生物技术领域，流式电转染系统犹如一颗璀璨的明珠，散发着耀眼的光芒。它所涉及的技术原理和应用场景，对于许多科研工作者以及相关领域的从业者来说，都有着至关重要的意义。流式电转染系统的核心在于其巧妙地利用了电场的作用来实现细胞的转染。当细胞悬浮在特定的缓冲液中时，施加适当的电场脉冲，会在细胞膜上形成微小的孔隙。这些孔隙就像是临时开启的“通道”，使得外源物质，比如核酸分子等，能够进入细胞内部。这一过程看似简单，实则蕴含着精密的科学设计。电场的强度、脉冲的时间和次数等参...

瘤内免疫疗法（ITIT）致力于通过直接刺激肿瘤中的免疫系统来逆转局部肿瘤介导的免疫抑制，从而产生有效的抗肿瘤免疫。使用体内质粒转染作为瘤内癌症免疫疗法的白细胞介素12（IL-12）的体内表达进入转移性黑色素瘤的II期临床试验，但临床成功率有限。我们试图通过在编码IL-12的质粒治疗中加入表达CD154（CD40配体）的质粒来提高体内IL-12电穿孔的疗效，并评估对实体瘤的疗效。患有皮内B16F10黑色素瘤或MC38小鼠结肠癌肿瘤的小鼠每周接受2次瘤内（IT）注射编码IL-12...

突出第一次全面表征永生化T细胞系CTLL-2和HT-2。质粒电穿孔可实现高效且具有成本效益的T细胞工程。用于T细胞电穿孔的优化转基因启动子和质粒结构。多功能转基因递送策略简化了T细胞工程工作流程。用于精确T细胞工程的高效CRISPR/Cas9基因组编辑工具包。摘要转基因T细胞疗法最近的临床成功凸显了加速T淋巴细胞基础研究和功能筛选方法的迫切需要。然而，一种简单且具有成本效益的T细胞高效基因工程方法仍然难以捉摸。目前的方法通常依赖于病毒转导，这是劳动密集型的，需要严格的生物安全...

突出转基因允许将有益性状（如抗虫害和改善营养）引入作物，从而有助于满足全球粮食需求并提高农业复原力。农杆菌介导的转化和生物列表学等传统方法面临效率低、组织损伤和不可预测的基因整合等问题，这些问题限制了其有效性。纳米颗粒通过克服植物细胞壁障碍来提高基因递送效率和精度。将纳米技术与CRISPR/Cas和组织培养方法相结合，可以显著推进植物基因工程。纳米基因递送可以靶向细胞核、叶绿体和线粒体基因组，而不会造成明显的组织损伤，从而提高基因修饰的精度和有效性。摘要植物基因工程中的常规基...

体液免疫在建立和维持宿主-微生物群共生以及对病原微生物的免疫力中起着重要作用。然而，鉴定在屏障和全身组织内引发适应性免疫反应的抗原是进一步理解这种宿主-微生物对话的重大障碍。在这里，我们提供了一种方案，通过使用噬菌体（噬菌体）展示介导的抗体/抗原生物淘选来鉴定共生微生物和病原微生物表达的免疫原性蛋白抗原。该程序需要生成M13噬菌粒文库，生产ORFeome（开放阅读框总量）噬菌体文库，然后进行多轮基于亲和力的免疫沉淀，随后通过ELISA、ELISPOT和/或B细胞四聚体生成进行...